专科分类:肿瘤科
检查分类:免疫检查
适用性别: 男女均适用
均适用是否空腹:空腹
参考价格:50-90元
形态学检查法比较受检组与对照组,P<0.05。
125I或51Cr法P>0.05。
异常结果:本试验可以作为体外测定肿瘤患者细胞免疫的指标;也可以通过测定机体免疫活性细胞杀伤肿瘤细胞的能力,来判断肿瘤患者的预后;还可以鉴定淋巴细胞的功能性亚群。
需要检查的人群:淋巴细胞毒交叉试验也称补体依赖细胞毒试验(CDC)。它是检查器官移植受者体内有无针对供者,或者供者针对受者的HLA抗体,在器官移植前一定要进行CDC检测。
(1)在测定受检者淋巴细胞攻击肿瘤细胞的能力时,实验组中加入肿瘤细胞和受检者淋巴细胞,对照组中加入肿瘤靶细胞和培养液。若检测其它样品如肿瘤抗原或免疫原、治疗药物等与细胞免疫的关系,则应增设第3组,在此试验组中先使淋巴细胞与待测样品作用,继经洗涤后再观察此“致敏淋巴细胞”对肿瘤靶细胞的杀伤作用。此时前两组成为对照组。
(2)靶细胞与淋巴细胞的活率要处于最佳状态,一般要>90%。
(3)加入培养液中的小牛血清须先作毒性试验。
(4)接种靶细胞和淋巴细胞的计数要准确。
(5)实验组和对照组应安排在同一块板上以减少误差。
(6)培养液的pH以6.8~7.2最为适宜。
(1)靶细胞的接种:选用能贴壁生长的肿瘤细胞,用Hank液洗涤后经2.5g/L胰酶消化2~3min,倒去胰酶液(细胞仍贴在瓶壁),用Hank液轻洗细胞3次,倒去Hank液。用含10%~20%小牛血清的RPMI 1640液将贴壁细胞冲洗下来,用100目滤网过滤除去细胞团块,制备成1×106/ml单个肿瘤细胞悬液,用滴管吸取细胞悬液滴入40孔培养板中,每孔1滴(约含100~150个细胞),置培养板于37℃含5% CO2孵箱中20h。取出培养板甩去其中培养液,瑞氏染色后计数每10孔中平均贴壁的肿瘤细胞数,如果两组平均数相差>1/3,表明误差太大不能使用,如果误差不大其它各培养板可进行正式试验。
(2)分离淋巴细胞:取受检者肝素抗凝血3ml,用聚蔗糖-泛影葡胺分层液分离淋巴细胞后再用Hank液洗3次,然后用RPMI 1640液配成(2~3)×105/ml细胞悬液。
(3)细胞毒试验:淋巴细胞和靶细胞按200∶1比例混合,每孔中加入(2~3)×104个淋巴细胞(0.1ml体积中)约每孔再加入含20%小牛血清的RPMI 1640液0.1ml,置培养板于37℃ 5%CO2孵箱中40h。取出培养板甩去培养液,瑞氏染色后于显微镜下计数培养板底部残留的靶细胞数。
暂无禁忌。
暂无相关并发症和危害。