端粒酶活性目录

1. 基本信息

专科分类:肿瘤科

检查分类:免疫检查

适用性别: 男女均适用

均适用是否空腹:非空腹

参考价格:30-35元

2. 正常值

阴性。

3. 临床意义

1、肝癌患者有较高的端粒酶阳性率(85%),端粒酶活性阳性者AFP水平明显高于端粒酶活性阴性者。端粒酶活性与肿瘤大小、组织学分级及肿瘤转移无显著相关。端粒酶有可能成为诊断肝癌的肿瘤标志物。

2、端粒酶在大多数恶性肿瘤组织有较高水平表达,如神经母细胞瘤(94%)、乳腺癌(93%)、大肠癌(93%)、胃癌(85%)、前列腺癌(84%)、肺癌(80%)等。端粒酶活性与肿瘤的临床分期及预后密切相关。因此,端粒酶是目前最特异和具有普遍性的肿瘤标记物。

3、在少数良性病变(如肝炎、肝硬化、良性脑膜瘤等)组织中可有很弱的端粒酶活性。

4. 注意事项

近年来,“端粒、端粒酶假说”已被越来越多的研究所证实,以端粒酶活性水平为肿瘤诊断的生物标志和预后指标。

1.注意防止实验室污染而出现假阳性或假阴性。

2.注意去除组织标本中含有的多聚酶抑制剂,减少假阴性。

3.闪烁分析技术、ELISA法、原位杂交法较TRAP法检测结果更可靠。

5. 检查过程

检查操作:

基因组DNA为0.1μg;缓冲液含50mmol/L氯化钾,10mmol/L Tris-HCl(pH8.4),1.5mmol/L氯化镁,100μg明胶;每一引物为0.25μmol/L;dATP,dCTP,dGTP,dTIP各为200μmol/L;DNA聚合酶为2.5U,终体积为100μl。加数滴液体石蜡防止蒸发。

反应周期:①变性:90℃ 30~60s;②引物和模板的退火温度:40~60℃ 30~60s;③延伸:72℃ 1~2min。经反复循环30~40次,最后1次72℃引物延伸7min后终止。除去液体石蜡后,产物可供分析。经琼脂糖凝胶电泳后,用溴乙锭染色,经紫外灯照射可见预料扩增长度的荧光条带。产物也可与放射标记或非放射标记的寡聚核苷酸探针行Southern印迹杂交或点渍印迹杂交。如用PCR自动仪则更为方便,将反应试剂、DNA模板及Taq-DNA聚合酶加入试管后,放进已调好程序,即所需变性→退火→延伸各自的温度和时间及循环次数的自动仪中进行反应,即可获得满意的扩增产物。

6. 不适宜人群

无检测适宜症者不宜检测。

7. 不良反应与风险

1、感染:采集血液时注意无菌操作,采血处避免水液等污染,以免局部感染。

2、出血:采血后给予充分按压时间,尤其有凝血障碍,出血倾向者,避免局部皮下渗血,淤青肿胀。